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Haematologic HCVA-0110說(shuō)明書(shū)

發(fā)布時(shí)間:2018/11/3      點(diǎn)擊次數(shù):1244

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊(cè)公司,是一家專(zhuān)業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級(jí)聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過(guò)150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開(kāi)發(fā),合同制造和合同研究。

 

haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊(cè)公司,是一家專(zhuān)業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級(jí)聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過(guò)150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗(yàn)開(kāi)發(fā),合同制造和合同研究。

 

Coagulation Factor Va

 

凝血因子Va

說(shuō)明了因子Va在凝血酶原
酶組裝中的參與和凝血酶原酶復(fù)合物的表達(dá)。由重(VaH)和輕(VaL)鏈組成的因子Va與帶負(fù)電荷的磷脂膜結(jié)合并有效地用作膜結(jié)合因子X(jué)a(Xa)的受體。酶復(fù)合物用于將酶原凝血酶原(II)轉(zhuǎn)化為活性絲氨酸蛋白酶凝血酶(IIa),在蛋白水解事件中除去凝血酶原的片段1.2(F1.2)部分。

 

 

HCVA-0110 Human Factor Va

Size

50 µg

Formulation

50% (vol/vol) glycerol/5 mM CaCl2

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

BCVA-1110 Bovine Factor Va

 

Size

100 µg

Formulation

50% (vol/vol) glycerol/5 mM CaCl2

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

 

因子Va是絲氨酸蛋白酶因子X(jué)a的輔因子,并且在鈣離子存在下,它們共同組裝在磷脂表面上以形成凝血酶原酶復(fù)合物(1)。凝血酶原酶復(fù)合物負(fù)責(zé)凝血酶原快速轉(zhuǎn)化為凝血酶。因子Va由α-凝血酶在有限的蛋白水解作用下衍生自促輔因子,因子V. 因子V的凝血酶裂解從分子的中心部分釋放出兩個(gè)重度糖基化的活化肽,其沒(méi)有輔因子功能。因子Va由NH2-末端衍生的重鏈(Mr = 94,000)和COOH-末端衍生的輕鏈(Mr = 74,000)組成,其在鈣離子存在下保持締合。輔因子結(jié)合磷脂(細(xì)胞膜)表面并有效地充當(dāng)膜結(jié)合因子X(jué)a的受體。凝血酶原酶復(fù)合物(因子X(jué)a,因子Va,磷脂和鈣)的*組裝導(dǎo)致凝血酶原轉(zhuǎn)化率相對(duì)于單獨(dú)因子X(jué)a觀察到的速率增加300,000倍。因子Va和因子X(jué)a之間的相互作用由因子Va的重鏈和輕鏈介導(dǎo),而凝血酶原與因子Va的結(jié)合僅由重鏈介導(dǎo)。

通過(guò)用凝血酶活化純化的因子V來(lái)制備因子Va,隨后通過(guò)免疫親和層析(2)純化。該過(guò)程產(chǎn)生不含活化肽和凝血酶的輔因子制劑。純化因子Va以50%甘油(體積/體積),5.0mM CaCl 2提供,并應(yīng)儲(chǔ)存在-20℃。通過(guò)SDS-PAGE分析測(cè)定純度,并在因子Va凝固測(cè)定中測(cè)量活性。

 

凝膠

Novex 4-12%Bis-Tris

加載

人因子Va,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標(biāo)準(zhǔn)

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

特別說(shuō)明

因子V是一種非常不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)。一些降解的碎片通常在制劑中是顯著的

本土化

等離子和膜表面

行動(dòng)方式

凝血酶原酶復(fù)合物中因子X(jué)a的輔因子

分子量

168,000(基于亞基的組合分子量)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 17.4(3)

 

結(jié)構(gòu)體

兩個(gè)亞基,Mr 94,000(重鏈)和74,000(輕鏈)(4)

碳水化合物百分比

約8%(基于人因子Va的計(jì)算分子量)

 

參考

本土化

等離子和膜表面

行動(dòng)方式

凝血酶原酶復(fù)合物中因子X(jué)a的輔因子

分子量

168,000(基于亞基的組合分子量)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 17.4(3)

 

結(jié)構(gòu)體

兩個(gè)亞基,Mr 94,000(重鏈)和74,000(輕鏈)(4)

碳水化合物百分比

約8%(基于人因子Va的計(jì)算分子量)

 

出版物

  • Monteiro,R.,et al。,Biochem。J.(2005)387,871-877。(凝血酶原激活)
  • Reis,C.,et al。,Biochem。J.(2006)398,295-302(凝血酶原激活)

 

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7:我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批發(fā),歡迎合作。

 


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