progen PRHYPE-XS說(shuō)明書

Hyperphage M13 K07ΔpIII

噬菌體M13 K07ΔpIII

在包裝普通噬菌體展示噬菌體中提供輔助噬菌體功能。通過(guò)pIII感染細(xì)菌。

產(chǎn)品信息：

數(shù)量

5 x 2毫升（凍干）

從超噬菌體包裝的圖書館中分離重組抗體，蛋白質(zhì)或肽的有效工具。

優(yōu)點(diǎn)

• 提高平移效率
• 允許以較少的淘選抗原淘選
• 識(shí)別高親和力和低親和力的粘合劑

介紹

Rondot等人開發(fā)了一種輔助噬菌體技術(shù)（“超噬菌體系統(tǒng)”）。（Nature Biotechnology 19：75-81，2001）。Hyperphage系統(tǒng)可通過(guò)增加每個(gè)噬菌體顆粒展示的抗體數(shù)量（多5個(gè)對(duì)0.01個(gè)）來(lái)改善在噬菌體展示中的抗體展示，因此該系統(tǒng)在功能基因分析和蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域具有巨大優(yōu)勢(shì)。淘選噬菌體可以用少量抗原和更高的效率進(jìn)行。例如，通過(guò)在二維凝膠電泳后在蛋白斑點(diǎn)的印跡上采用超噬菌體包裝的文庫(kù)淘選，可以改善通用庫(kù)在抗體分離中的應(yīng)用。

更多應(yīng)用

可以通過(guò)針對(duì)合成的膜結(jié)合肽表位淘選來(lái)分析大量開放閱讀框（ORF）。在癌癥研究中，超噬菌體包裝庫(kù)可能是通過(guò)在細(xì)胞表面上淘洗來(lái)發(fā)現(xiàn)新腫瘤標(biāo)志物的工具。

巨噬細(xì)胞系統(tǒng)

巨噬細(xì)胞在pIII基因中帶有一個(gè)缺失。它們由產(chǎn)生功能性pIII的大腸桿菌包裝細(xì)胞系產(chǎn)生，該功能性pIII用于包裝具有pIII缺失的噬菌體基因組。產(chǎn)生的巨噬細(xì)胞在其表面上帶有功能性pIII，但基因組中缺少pIII基因。然后，這些巨噬細(xì)胞可用于通過(guò)噬菌粒文庫(kù)感染細(xì)菌。每個(gè)產(chǎn)生的展示噬菌體在其表面上攜帶抗體或肽的幾個(gè)拷貝，從而顯著提高淘選效率。

pSEX Phagemid抗體基因庫(kù)的例子

通過(guò)使用巨噬細(xì)胞，抗原結(jié)合提高了兩個(gè)數(shù)量級(jí)以上。此外，由于攜帶抗體的質(zhì)粒（噬菌粒）編碼pIII和scFv片段之間的蛋白酶切割位點(diǎn)，因此可以通過(guò)蛋白酶處理洗脫超噬菌體包裝的文庫(kù)，從而洗脫高親和力的結(jié)合物，并恢復(fù)野生型感染性表型以優(yōu)化目的抗體基因的回收。